Kîta Tesbîtkirina Mutasyonên Gena 29 a EGFR ya Mirovan (PCR ya Floresansê)-RUO
Navê berhemê
Kîta Tesbîtkirina Mutasyonên Gena 29 a EGFR ya Mirovan (PCR ya Floresansê)-RUO
Epîdemîolojî
Penceşêra pişikê bûye sedema sereke ya mirinên ji ber penceşêrê li çaraliyê cîhanê, ku bi ciddî tenduristiya mirovan tehdît dike. Penceşêra pişikê ya şaneya ne-biçûk ji sedî 80-85ê nexweşên penceşêra pişikê pêk tîne. EGFR niha hedefa molekulî ya herî girîng e ji bo dermankirina penceşêra pişikê ya şaneya ne-biçûk. Fosforîlasyona EGFR dikare mezinbûn, cûdabûn, dagirkirin, metastaz, antî-apoptozê ya hucreyên tumorê pêş bixe û anjîyogeneza tumorê pêş bixe. Astengkerên tîrozîn kînazê yên EGFR (TKI) dikarin rêya sînyala EGFR bi astengkirina otofosforîlasyona EGFR asteng bikin, bi vî rengî zêdebûn û cûdabûna hucreyên tumorê asteng bikin, apoptoza hucreyên tumorê pêş bixin, anjîyogeneza tumorê kêm bikin, û hwd., da ku dermankirina hedefgirtî ya tumorê pêk bînin [1]. Hejmareke mezin ji lêkolînan nîşan dane ku bandora dermankirinê ya EGFR-TKI bi rewşa mutasyona gena EGFR ve girêdayî ye, û dikare bi taybetî mezinbûna hucreyên tumorê yên bi mutasyona gena EGFR asteng bike [2,3]. Gena EGFR li ser milê kurt ê kromozom 7 (7p12) ye, bi dirêjahiya tevahî 200Kb ye û ji 28 eksonan pêk tê. Herêma mutasyonê bi giranî di eksonên 18 heta 21 de ye, kodonên 746 heta 753 mutasyona jêbirinê li ser eksona 19 bi qasî %45 û mutasyona L858R li ser eksona 21 bi qasî %40 heta 45 pêk tîne [4]. Rêbernameyên NCCN ji bo Teşhîs û Dermankirina Kansera Pişikê ya Hucreya Ne-Biçûk bi zelalî destnîşan dikin ku ceribandina mutasyona gena EGFR berî dayîna EGFR-TKI hewce ye. Ev kîta testê ji bo rêberiya dayîna dermanên astengkerê tîrozîn kînaza reseptora faktora mezinbûna epidermal (EGFR-TKI) tê bikar anîn, û bingeha dermanê kesane ji bo nexweşên bi kansera pişikê ya hucreya ne-biçûk peyda dike. Ev kît tenê ji bo tespîtkirina mutasyonên hevpar di gena EGFR de li nexweşên bi kansera pişikê ya hucreya ne-biçûk tê bikar anîn. Encamên testê tenê ji bo referansa klînîkî ne û divê wekî bingehek tenê ji bo dermankirina kesane ya nexweşan neyên bikar anîn. Divê bijîşk rewşa nexweş, nîşanên dermanan û dermankirinê li ber çavan bigirin. Nîşaneyên reaksiyon û testên din ên laboratîf û faktorên din ji bo nirxandina berfireh a encamên testê têne bikar anîn.
Qenal
| Tampona Reaksiyonê | Qenal |
| Tampona Reaksiyonê ya EGFR IC | Kanala FAM |
| Tampona Reaksiyonê ya L858R | Kanala FAM |
| Tampona Reaksiyonê ya 19del | Kanala FAM |
| Tampona Reaksiyonê ya T790M | Kanala FAM |
| Tampona Reaksiyonê ya G719X | Kanala FAM |
| Tampona Reaksiyonê ya 3Ins20 | Kanala FAM |
| Tampona Reaksiyonê ya L861Q | Kanala FAM |
| Tampona Reaksiyonê ya S768I | Kanala FAM |
Parametreyên Teknîkî
| Embarkirinî | Şile: ≤ -18℃ Di tariyê de |
| Demê rafê | 12 meh |
| Cureyê Nimûneyê | şaneyên tumorê yên teze, beşa patolojîk a cemidî, şaneyên an beşa patolojîk a bi parafînê ve hatî çandin, plazma an serum |
| CV | <5.0% |
| LoD | tespîtkirina çareseriya reaksiyona asîda nukleîk di bin paşxaneya 3ng/μL cureya kovî de, dikare bi awayekî stabîl rêjeya mutasyonê ya 1% tespît bike; b) reaksiyona asîda nukleîk Di bin rêjeya mutasyonê ya 1% de, mutasyona 1×103Kopî/mL dikare bi awayekî stabîl di paşxaneya cureya kovî ya 1×105Kopî/mL de were tespît kirin; c) Çareseriya reaksiyona referansa navxweyî dikare berhema referansê SW3 bi sînorê tespîtkirinê yê herî nizm ê referansa navxweyî ya pargîdaniyê tespît bike. Dema ku kît materyalê referansa sînorê tespîtkirina neteweyî tespît bike, materyalê referansa sînorê tespîtkirina frekansa mutasyonê ya 2.5% û mutasyona zêdekirina gena EGFR bi guherîna hejmara kopiyê ya 4 dikare bi awayekî stabîl were tespît kirin. |
| Taybetmendî | Bi DNAya genomîk a mirovî ya cureya kovî û celebên din ên mutant re reaksiyonek xaçerêyî tune ye. |
| Amûrên Pêkanîn | Sîstemên PCR-ê yên Applied Biosystems 7500 yên Demrast, Sîstemên PCR-ê yên Dema Rast ên Applied Biosystems 7300, Pergalên PCR yên Demrast ên QuantStudio® 5, Sîstema PCR ya LightCycler® 480 ya Demrast, Sîstema PCR ya Demrast a BioRad CFX96. |
Herikîna Kar
Reagentên pêwîst lê nehatine peyda kirin:Ava bê DNase/RNase, etanol bêav. Dema ku nimûneyek tevnê ya bi parafîn ve hatî bicîhkirin tê ceribandin, tê pêşniyar kirin ku Kîta Tevnê ya QIAamp DNA FFPE (56404) ya QIAGEN û Kîta Rapid Extraction DNA ya Tevnê ya bi Parafîn ve hatî bicîhkirin (DP330) ya Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. bikar bînin. Dema ku nimûneya plazma/serum tê ceribandin, tê pêşniyar kirin ku Kîta DNA/RNA ya Giştî ya Macro & Micro-Test (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (ku dikare bi Makro & Mîkro-Test Automatic Nucleic Acid Extractor (HWTS-3006C, HWTS-3006B) re were bikar anîn) ya Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd. an Kîta Acidê ya Navokî ya QIAamp (55114) ya QIAGEN bikar bînin.
Amûrên xerckirinê pêwîst in lê nayên peyda kirinSerî: Serî yên Bê DNase/RNase, lepikên yekcar bikarhatî, lûleya santrifûjê ya Bê DNase/RNase, şerîtên 8-lûleyî ji bo PCR, santrifûj.
