Kîta Tesbîtkirina Mutasyonên KRAS 8 (PCR ya Floresansê)-RUO
Navê berhemê
Kîta Tesbîtkirina Mutasyonên KRAS 8 (PCR ya Floresansê)-RUO
Epîdemîolojî
Mutasyonên xalî di gena KRAS de di gelek cureyên tumorên mirovan de hatine dîtin, rêjeya mutasyonê di tumorê de bi qasî %17~25, rêjeya mutasyonê di nexweşên penceşêra pişikê de %15~30, rêjeya mutasyonê di nexweşên penceşêra kolon û rektûmê de %20~50 e. Ji ber ku proteîna P21 ku ji hêla gena K-ras ve tê kodkirin li jêr rêya sînyala EGFR-ê ye, piştî mutasyona gena K-ras, rêya sînyala jêr her gav tê çalakkirin û ji hêla dermanên hedefgirtî yên jorîn ên li ser EGFR-ê ve nayê bandorkirin, ku di encamê de zêdebûna domdar a xerab a hucreyan çêdibe. Mutasyonên di gena K-ras de bi gelemperî li nexweşên penceşêra pişikê li hember astengkerên tîrozîn kînazê yên EGFR û li nexweşên penceşêra kolon û rektûmê li hember dermanên antî-EGFR berxwedanê didin [1, 2, 3]. Di sala 2008an de, Tora Neteweyî ya Berfireh a Penceşêrê (NCCN) rêbernameyek pratîkî ya klînîkî ji bo penceşêra kolonê derxist, ku destnîşan kir ku cihên mutasyonê yên ku dibin sedema çalakbûna K-ras bi giranî di kodonên 12 û 13 yên eksona 2 de ne, û pêşniyar kir ku hemî nexweşên bi penceşêra kolonê ya metastatîk a pêşkeftî berî dermankirinê ji bo mutasyona K-ras werin ceribandin [4]. Ji ber vê yekê, tespîtkirina bilez û rast a mutasyona gena K-ras di rêberiya dermanên klînîkî de pir girîng e. Ev kît DNA wekî nimûneya tespîtkirinê bikar tîne da ku nirxandina kalîtîf a rewşa mutasyonê peyda bike, ku dikare alîkariya klînîsyenan bike di ceribandina penceşêra kolonê, penceşêra pişikê û nexweşên tumorê yên din ên ku ji dermanên hedefgirtî sûd werdigirin. Encamên testa kîtê tenê ji bo referansa klînîkî ne û divê wekî bingeha yekane ji bo dermankirina kesane ya nexweşan neyên bikar anîn. Divê klînîsyen li ser encamên testê li gorî faktorên wekî rewşa nexweş, nîşanên dermanan, bersiva dermankirinê û nîşaneyên din ên testa laboratîf biryarên berfireh bidin.
Parametreyên Teknîkî
| Embarkirinî | ≤-18℃ |
| Demê rafê | 12 meh |
| Cureyê Nimûneyê | beşên patolojîk ên bi parafînê mirovî ve hatine bicihkirin |
| CV | ≤5.0% |
| LoD | a) Tampona Reaksiyonê ya K-ras A û Tampona Reaksiyonê ya K-ras B dikarin rêjeya mutasyonê ya 1% di bin paşxaneya celebê kovî ya 3ng/μL de bi awayekî stabîl tespît bikin; b) Mutasyonek ji 1×103Kopî/mL dikarin di paşxaneyek celebê kovî ya 1×10 de bi awayekî stabîl werin tespît kirin.5Kopî/mL dema ku rêjeya mutasyonê 1% be; c) Dema ku referansa LoD ya pargîdaniyê SW3 tê ceribandin, nirxa Ct tune ye an jî nirxa Ct = 0 ji bo Tampona Reaksiyonê A û Tampona Reaksiyonê B heye. |
| Amûrên Pêkanîn | Pergalên PCR-ya Demrast a Applied Biosystems 7500, Pergalên PCR-ya Demrast a Applied Biosystems 7300, Pergalên PCR-ya Demrast a QuantStudio®5, Sîstema PCR-ya Demrast a LightCycler® 480, Sîstema PCR-ya Demrast a BioRad CFX96. |
Herikîna Kar
Reaktan pêwîst e lê nehatiye peyda kirin:H2O bê DNase/RNase, etanol bêav. Dema ku nimûneyek tevnê ya bi parafînê ve hatî bicîhkirin tê ceribandin, tê pêşniyar kirin ku Kîta Tevnê ya QIAamp DNA FFPE (56404) û Kîta Rapid Extraction DNA ya Tevnê ya bi Parafînê ve hatî bicîhkirin (DP330) ya QIAGEN-ê ku ji hêla Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. ve hatî çêkirin, bikar bînin.
Kelûpelên pêwîst lê nehatine peyda kirin:Serî yên bê DNase/RNase, lepikên yekcar bikarhatî, lûleya santrifûjê ya bê DNase/RNase, şerîtên 8-lûleyî, santrifûj.
